摘要: 尼帕病毒(Nipah virus, NiV)是一种严重的人畜共患副粘病毒,致死率高(40%-75%),被WHO列为优先研究的病原体。在急性感染期,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)是确诊的金标准。本文探讨了鼻咽拭子标本在NiV检测中的临床应用价值,分析了样本采集过程中的关键变量,并重点评估了采用麦瑞科林DSK-F10-96非灭活病毒采样管套装进行标本采集与转运的技术优势。

尼帕病毒感染可引发无症状感染、急性呼吸道感染(轻度至重度)以及致死性脑炎。病毒主要通过接触受感染动物(如蝙蝠、猪)的体液或食用受污染食物传播,亦存在人际传播风险。
在临床诊断中,样本的选择至关重要:
急性期(发病前4-5天): 病毒主要在呼吸道复制。此时,鼻咽拭子 和口咽拭子是检测病毒RNA的首选标本,其阳性检出率通常高于血液样本。
恢复期/晚期: 病毒可能进入中枢神经系统,此时脑脊液(CSF)检测更为关键。
对于一线发热门诊和筛查工作,高质量的鼻咽拭子采集是实现“早发现、早隔离”的关键。
RT-PCR检测靶向NiV的N基因(核衣壳蛋白基因)或其他保守区域。由于RNA病毒本身的不稳定性以及样本中RNase(核糖核酸酶)的存在,标本采集的前分析阶段(Pre-analytical Phase)面临巨大挑战:
样本采集量: 拭子必须能从鼻咽后壁采集足够的上皮细胞和粘液。
洗脱效率: 采集到的病毒必须能从拭子纤维中高效释放到保存液中。
样本稳定性: 在转运至BSL-3/BSL-4实验室的过程中,必须维持病毒核酸的完整性。
为了确保RT-PCR检测的敏感性,避免假阴性结果,推荐使用麦瑞科林(Mantacc)DSK-F10-96病毒采样管套装。该套装包含一支96000型鼻咽植绒拭子和一瓶非灭活型病毒保存液,其设计完全符合NiV等高致病性病毒的采集标准。
传统的棉签或纤维缠绕拭子容易将样本截留在纤维基质中,导致释放率低(仅约为20%-30%)。麦瑞科林96000拭子采用尼龙植绒技术,具有以下显著优势:
垂直纤维结构: 尼龙纤维垂直喷射在拭子头部,形成类似“毛刷”的结构。这种开放式结构利用毛细管作用,极大增加了表面积,能迅速吸收大量样本。
高效洗脱: 实验数据显示,植绒拭子的样本释放率可达90%-95%。在接触保存液及离心过程中,吸附的病毒颗粒能迅速脱落进入液相,直接提高了PCR反应体系中的模板浓度。
人体工程学设计: 96000拭子杆部柔软细长,适合鼻腔解剖结构,能深入鼻咽腔后壁而不损伤粘膜,且设有注塑断点,采样后易于折断入管,减少气溶胶污染风险。
对于尼帕病毒的检测,部分实验室可能需要进行病毒分离培养或需要完整的病毒颗粒进行抗原分析。麦瑞科林套装中的非灭活保存液(通常基于Hanks液改进)具有关键作用:
维持活性与结构: 保存液成分能维持病毒蛋白外壳和核酸的稳定性,保护病毒免受降解。这对于需要在高等级生物安全实验室进行后续病毒培养的研究至关重要。
抗菌抗真菌: 添加了广谱抗生素和抗真菌剂,有效抑制口腔及鼻腔共生菌群的生长,防止细菌污染干扰后续的PCR扩增或细胞培养。
缓冲环境: 提供稳定的pH值和渗透压,确保样本在4℃或室温短途运输下的稳定性。
注意: 尼帕病毒属于BSL-4(P4)级病原体。虽然临床样本采集通常在医院进行,但必须严格遵守高等级防护标准。
个人防护(PPE): 采样人员应穿戴N95/KN95口罩、护目镜/面屏、双层乳胶手套及隔离衣。
采集操作:
取出麦瑞科林96000植绒拭子。
让患者头部微后仰,将拭子平行于上腭轻轻插入鼻道,直至遇到阻力(鼻咽后壁)。
轻轻旋转拭子10-15秒以吸附分泌物。
缓慢取出,迅速放入含非灭活保存液的采样管中。
在断点处折断拭子杆,旋紧管盖。
转运与处理:
样本应置于三层包装中,并标记生物危害标识。
重要提示: 由于使用的是非灭活保存液,样本中可能含有活病毒。严禁在非生物安全柜(BSC)内打开管盖。核酸提取前的灭活处理必须在符合BSL-3或以上资质的实验室中进行。
在尼帕病毒的早期诊断中,RT-PCR的准确性高度依赖于标本质量。采用麦瑞科林96000非灭活病毒采样管套装,结合其专利的尼龙植绒拭子技术和稳定的非灭活保存介质,能够显著提升病毒载量的回收率,为临床医生提供更可靠的分子诊断依据。对于承担公共卫生防疫任务的医疗机构而言,这是确保检测标准化和精准化的优选方案。
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