许多病原微生物在离开宿主环境后非常脆弱,容易死亡或失去活力,导致后续培养失败和漏诊,运送培养基正是为解决这一难题而设计的,其主要功能是维持样本中微生物的活性,防止过度增殖或死亡,确保病原体在运输过程中尽可能保持原始状态。Stuart、Amies和Cary-Blair是三种最常用且各有侧重的运送培养基,它们共同构成了临床样本运输的基石,下面麦瑞科林给大家讲解下Stuart、Amies与Cary-Blair运送培养基的一些介绍和应用。
一、Stuart运送培养基
1、起源与核心特点: 于1948年由Stuart及其同事最初研制,主要用于淋病奈瑟氏菌(淋球菌)样本的运输。其核心设计理念是提供一个非营养性、半固体、还原性的环境。
非营养性: 不含或仅含极少量微生物可利用的营养物质,目的是抑制细菌在运输过程中的过度繁殖,防止优势菌掩盖目标病原体或改变样本的原始菌群比例。
半固体: 通常添加少量琼脂(约0.1-0.2%)形成软膏状,既能固定样本防止震荡损伤,又允许厌氧菌在深层生长。
还原性: 含有硫乙醇酸钠等还原剂,吸收氧气,降低培养基的氧化还原电位,有利于兼性厌氧菌和微需氧菌的存活。
2、主要应用:
3、定位: 适用于多种非粪便样本的通用型基础运输培养基。
二、 Amies运送培养基
1、起源与核心改良: Amies培养基是在Stuart培养基基础上进行的重要改良。其最显著的改变是用无机磷酸盐缓冲系统替代了Stuart中的甘油磷酸盐缓冲系统。
磷酸盐缓冲: 提供更稳定、更有效的pH缓冲能力,能更好地中和样本(尤其是脓性样本)中的酸性代谢产物,维持更中性的环境,显著提高了多种细菌(尤其是淋球菌)的存活率和存活时间。
保留优点: 继承了Stuart的非营养性、半固体和还原性特点。
2、主要应用: 应用范围与Stuart高度重叠,但通常认为效果更优,尤其在苛养菌方面:
咽拭子、鼻咽拭子
伤口拭子
生殖道拭子
同样适用于奈瑟氏菌属、链球菌属、假单胞菌属等。其改良的缓冲能力使其对多种细菌的保存效果更可靠。
3、特殊形式 - 含活性炭: Amies配方常添加活性炭(称为Amies with Charcoal)。活性炭能吸附样本中可能存在的毒性物质(如脂肪酸、残留抗生素、重金属离子等),特别有利于提高苛养菌(如淋球菌、嗜血杆菌属、弯曲菌属、幽门螺杆菌、拟杆菌属等)的存活率。因此,含活性炭的Amies培养基是运输这些脆弱病原体的首选。/3、定位: Stuart的优化替代品,是目前应用最广泛的通用非粪便样本运送培养基,尤其含活性炭版本是苛养菌运输的金标准之一。
三、 Cary-Blair运送培养基
1、起源与核心特点: 于1964年由Cary和Blair专门为粪便和肠道样本中病原体的运输而设计。其改良思路与Amies部分相似但目标不同:
磷酸盐缓冲系统: 同样使用磷酸盐缓冲液(代替Stuart的甘油磷酸盐),但关键调整是将pH值显著提高至8.4左右。
高pH(碱性): 这是其最突出的特点。碱性环境非常有利于维持沙门氏菌属和志贺氏菌属这两种最重要的肠道致病菌的活力。同时,这个pH值也特别适合弧菌属的生长和存活,如霍乱弧菌、副溶血性弧菌等。这些菌在接近中性的Stuart/Amies中存活能力会下降。
半固体与还原性: 同样具有半固体(琼脂)和还原性(硫乙醇酸钠)特性,以维持厌氧环境和防止震荡损伤。
2、主要应用:
粪便样本(首选)
直肠拭子
其他疑似肠道感染的样本
核心目标菌:沙门氏菌、志贺氏菌、致病性弧菌(霍乱弧菌、副溶血性弧菌等)。
3、定位: 专为粪便和肠道致病菌(特别是沙门氏菌、志贺氏菌和弧菌) 运输设计的特殊运送培养基。是肠道感染病原学诊断样本运输的金标准。
四、总结与选择依据:
Stuart: 经典基础型,适用于一般非粪便样本(咽、伤口、生殖道),对奈瑟菌、链球菌、假单胞菌有效。逐渐被Amies替代。
Amies (尤其含活性炭): Stuart的优化升级版,是目前非粪便样本(咽、伤口、生殖道)的首选通用运输培养基。缓冲能力更强,细菌存活率更高。含活性炭版本是苛养菌(淋球菌、嗜血杆菌、弯曲菌等)运输的金标准。
Cary-Blair: 粪便和肠道样本的专用运输培养基,其高pH特性是保障沙门氏菌、志贺氏菌和弧菌存活的关键。
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