耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是一种特殊的葡萄球菌，经常出现在人体皮肤或鼻孔中，不会对人体造成伤害。但是，如果这些细菌从开放性伤口进入，就会引发感染。大多数葡萄球菌感染是轻微的，可以用抗生素治疗。然而，MRSA 细菌对普通抗生素有抗药性，导致其肆意生长--这种现象被称为抗生素耐药性。这种抗药性使治疗变得复杂，导致美国每年有近 300 万例感染和超过 35,000 例死亡。
MRSA 最初流行于医院，现在在健康人中无处不在。它可以通过个人接触或与受污染物体的相互作用传播。它在宿舍或更衣室等拥挤的环境中尤为流行。MRSA 的鉴定是通过检测分析伤口、鼻孔或其他体液样本来完成的。如果不及时治疗，MRSA 感染可能会发展成重症或死亡，但可以使用强效抗生素进行治疗。
我们将深入探讨如何进行检测，以及医生如何利用这种检测来识别和管理这种具有挑战性的病原体。敬请关注，全面了解这一过程。
采集 MRSA 拭子样本的说明
在采集 MRSA 鼻腔、咽喉和腹股沟拭子进行检测时，请仔细遵循以下步骤说明。
采集拭子前
- 用肥皂和水彻底清洗双手。
- 准备所需材料：拭子包、运送管、患者标签、生物危险袋。
鼻咽样本采集：
1. 打开鼻咽拭子包，取出拭子。
2. 将拭子顶端插入一个鼻孔，对着鼻黏膜轻轻旋转。
3. 使用相同的棉签在第二个鼻孔重复上述操作。
4. 将拭子插入输送管，在断点处折断拭子轴。
咽喉样本采集：
1. 打开口咽拭子包，取出拭子。
2. 将口咽拭子尖端插入咽后和扁桃体区域并轻轻旋转。
3. 将口咽拭子插入输送管，在断点处折断咽拭子杆。
腹股沟拭子：
1. 打开腹股沟拭子包，取出拭子，只处理拭子轴。
2. 擦拭腹股沟褶皱处的皮肤，旋转棉签尖端数次。
3. 将拭子插入运输管，在断点处折断拭子轴。
采集后：
- 在所有运送管上贴上患者身份标签。
- 将运送管放入生物危险袋中进行处理。
- 适当丢弃用过的拭子包。
MRSA 筛查试验
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为全球医疗相关感染的主要原因。MRSA 指的是对β-内酰胺类抗生素（包括青霉素类、头孢菌素类和碳青霉烯类）具有耐药性的金黄色葡萄球菌菌株。这种耐药性是由 mecA 基因介导的，该基因编码一种改变的青霉素结合蛋白 PBP2a，它对这些抗生素的亲和力较低，即使在有β-内酰胺存在的情况下也能合成细胞壁。
在临床实验室环境中准确检测 MRSA 对于选择适当的抗生素治疗和制定有效的感染控制措施至关重要。然而，由于可能存在异抗性，即在一个分离物中可能同时存在具有不同敏感性的亚群，因此确定甲氧西林耐药性具有挑战性。因此，要对 MRSA 菌株进行可靠的表型鉴定，就必须按照标准协议采用谨慎的检测方法。
检测理论
由于细菌培养物中可能存在异质性，准确检测金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药性十分困难。当同一分离物中同时存在耐药细胞亚群和易感细胞亚群时，就会出现这种现象，即异抗性。
与易感细胞相比，耐甲氧西林亚群的生长速度较慢。如果检测条件没有优化，生长速度较快的易感细胞可能会超过耐药细胞，从而导致假阴性结果。有几个因素会导致这种检测难题：
- 培养温度：抗性细胞在 33-35°C 的温度下生长得更好。更高的温度有利于易感细胞的生长。检测方案必须坚持 33-35°C 的孵育温度，以便进行可靠的检测。
- 诱导剂的选择：与氧青霉素相比，头孢西丁是更好的 mecA 表达诱导剂。它是最佳的替代标记物，应纳入检测程序。
- 培养时间：培养 24 小时可使生长较慢的耐药亚群充分生长。缩短培养时间有可能错过耐药性的表达。
完整的 MRSA 检测实验程序
1. 分离纯菌落：从培养板中获取分离良好的金黄色葡萄球菌菌落，制备标准细胞悬液进行检测。
2. 制备细胞悬液：将分离菌制成悬浮液，调整至 0.5 McFarland 浑浊度标准，以达到近似均匀的接种密度，供测试使用。
3. 接种测试板：将标准悬浮液接种到含有头孢西丁片的穆勒-欣顿琼脂试板上。在琼脂中加入 4% 的 NaCl。用无菌棉签将接种物均匀分布于平板的整个表面。
4. 培养平板：将接种过的平板倒置，在 33-35°C 下培养 24 小时，以便异抗亚群生长。
5. 评估生长情况：检查平板上头孢西丁盘周围是否存在抑制区。无抑菌区表示耐甲氧西林（MRSA）。如果存在，测量抑制区直径。
6. 确认：检测 如果表型结果不明确，则进行确证检测，如 mecA PCR。
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