当前位置: 首页 > 新闻中心 > 技术专栏 » 正文

关于Cary-Blair氏运送培养基一些常见问题

Cary-Blair氏运送培养基已成为微生物学领域不可缺少的工具。它在维护和运输细菌标本方面发挥着关键作用,特别是与肠道病原体有关的标本。由于微生物学分析依赖于准确和及时的诊断,使用适当的运输介质对于确保收集样本的完整性至关重要。

本文简要介绍了Cary-Blair运输介质,并强调了它在现代微生物学领域的重要性。接下来的章节将深入探讨这种运输介质的历史、组成和各种应用,以及讨论标本收集和处理的最佳实践。通过了解Cary-Blair运输介质在现代实验室诊断中的重要性,我们可以更好地理解它对提高微生物学分析的准确性和效率的影响。

Cary-Blair氏运送培养基5.jpg

一、Cary-Blair氏运送培养基的历史和发展

Cary-Blair运输介质起源于20世纪初,当时微生物学家正在寻求更好的方法来运输和保存用于分析的细菌标本。这种介质的开发是基于1943年Stuart博士创建的早期Stuart运输介质,目的是在运输过程中维持病原体细菌的生存能力。

随着对更有效的运输介质的需求增加,研究人员Cary博士和Blair博士在1964年推出了Stuart介质的改良版。这种新配方被命名为Cary-Blair运输介质,特别是针对肠道病原体(如沙门氏菌和志贺氏菌属)提供了改进的细菌生存能力。两种介质之间的关键差异在于用硫代乙酸钠替代了甘油磷酸酯,这有助于维持更稳定的pH值并减少细菌过度生长的风险。

随着时间的推移,Cary-Blair运输介质经过各种改进和修改,以进一步提高其在保存细菌标本方面的性能。今天,它被广泛认为是运输肠道病原体和其他细菌的黄金标准,它的使用为微生物学和实验室诊断领域的显著进步做出了贡献。

二、Cary-Blair氏运送培养基的组成和性质

Cary-Blair运输介质在保存细菌标本方面的有效性可以归因于其独特的组成和性质。介质由一种精心平衡的化学物质混合物组成,旨在在防止非目标微生物过度生长的同时,维持细菌细胞的生存能力。

Cary-Blair运输介质的关键成分之一是硫代乙酸钠,它作为一种还原剂发挥作用。这种物质有助于维持稳定的pH值,并创造出一个有利于目标细菌生存的环境,同时抑制不需要的微生物的生长。介质中的其他成分包括氯化钠,它有助于调节渗透压,以及氯化钙,它支持细菌细胞的结构完整性。

成分克/升
二氢磷酸二钠1.1
硫代乙酸钠1.5
氯化钠5.0
氯化钙0.1
琼脂5.0
pH25°C下8.4±0.2

三、 Cary-Blair氏运送培养基的制备

按照制造商的说明进行制备:

1. 将12.6克粉末悬浮在991毫升蒸馏水中。 

2. 加热至沸腾,完全溶解介质。

3. 冷却至50°C,无菌地加入1%的水钙氯溶液9毫升。(注意:Cary-Blair的各种商业可得到的脱水配方有所不同,有些需要添加钙氯化物,有些则不需要。) 

4. 如有必要,将pH调整到8.4。

5. 将7毫升的介质倒入9毫升容量的螺纹盖瓶(大号Bijou瓶),确保介质覆盖棉签至少4厘米。

6. 用松动的盖子蒸汽灭菌(不要自动消毒)在100°C下加热15分钟。

7. 冷却后,拧紧瓶盖并标记瓶子。

8. 为每个瓶子分配日期、批号和有效期(制备后6个月)。

9. 将瓶子存放在阴凉、干燥的地方,瓶盖要紧紧拧紧。

Woman researcher performing examination of bacterial culture plate

四、 Cary-Blair氏运送培养基的标本收集和处理

Cary-Blair运输介质特别适用于收集和运输各种标本,特别是与肠道病原体有关的标本。为确保微生物学分析的完整性和准确性,必须遵循适当的标本收集和处理程序。

使用Cary-Blair运输介质时,必须选择适当的标本类型,例如粪便样本或直肠拭子,以检测肠道病原体。收集过程应无菌进行,以避免污染并最小化引入非目标微生物的风险。

(1)标本收集

注意:在收集标本之前,患者应避免使用抗酸剂、钡、铋、抗生素、抗疟疾药物、止泻药物或油性泻药。收集标本应推迟5至10天或至少在服用钡或抗生素后两周。

1. 为确保恢复细菌,间歇收集多天的几个标本是必要的。

2. 为防止与尿液或水污染,正确的标本收集非常重要(请参见收集说明)。最好在便盆中收集标本。或者,使用一个干净、无菌的容器,例如一个去掉顶部并彻底清洗过的牛奶容器,或者在马桶座位开口处放置塑料薄膜。

3. 使用提供的收集勺,从粪便的侧面、末端和中部选择适当的区域(例如血腥、黏液或水样)。将容器填满足够的粪便到达“填充”线,结果大约为5毫升的样本。

4. 使用提供的勺搅拌每个标本,固定盖子,剧烈摇晃,直到标本混合均匀。混合完成后,标本应呈均匀状态。

5. 在每个瓶子上填写标签,并将瓶子放回塑料袋中。将标本运输到实验室。标本可以冷藏或存放在室温下。

(2)标本处理

Cary Blair介质协议包括一个缓冲系统,可防止出现酸性pH转移,从而对志贺氏菌和沙门氏菌属的恢复产生负面影响。如果缓冲能力超过了,将出现黄色,表明介质已达到不良酸性pH,不宜使用。为了获得最佳的细菌恢复效果,介质应呈红色。将Cary Blair体系瓶在20-25°C存储。该系统适用于多种程序,应视为综合检查的一部分。

在获取标本后,应立即将其转移到含有Cary-Blair运输介质的瓶子或容器中。必须彻底混合标本和介质,以确保细菌细胞的均匀分布和适当保存。还重要的是清晰地标记容器,包括相关信息,如患者详细信息、收集日期和时间。

在存储和运输方面,使用Cary-Blair运输介质的样本应保持在环境温度或冷藏温度下,理想情况下应在4°C和25°C之间。将样本运输到实验室应尽快进行,最好在收集后48小时内,以最大程度地提高恢复活细菌细胞的机会。

处理前:

1. 添加足够的样本以达到填充线。

2. 保持瓶子在室温下,避免极端温度。

3. 使用附在盖子上的勺子,彻底搅拌样本,直到样本均匀。

4. 重要提示:pH指示剂必须为红色。如果介质变黄,表明pH值为酸性,不适合使用。在这种情况下,必须收集新的标本。

处理过程:

1. 彻底混合瓶子中的内容。

2. 取下瓶盖,将其放在浸泡在消毒剂中的纸巾上。

3. 按照实验室的标准操作程序从Cary Blair瓶中接种介质。

4. 重新封闭瓶子,按照您的实验室传染性废物政策处置。建议在处置前进行高压灭菌或消毒。

五、Cary-Blair运输培养基的应用和好处

Cary-Blair运输培养基在微生物学中具有广泛的应用,特别是在肠道病原菌的分离和鉴定方面。其独特的成分和性质使其成为保存细菌在运输和储存过程中生命活力和形态的首选培养基,最终提高微生物诊断的准确性。

Cary-Blair运输培养基非常适合运输疑似含有肠道病原菌的临床样本,如志贺菌,沙门菌,霍乱弧菌和大肠杆菌O157:H7。其高pH(8.4)有助于维持霍乱弧菌的生命活力,因此Cary-Blair成为首选的霍乱弧菌运输和保存培养基。

Cary-Blair培养基的半固态一致性保证了其易于运输,而经过处理的培养基可在室温下保存一年。Cary-Blair培养基基质配方中含有最少的营养物质来支持微生物的生存而不促进微生物繁殖。培养基的碱性pH有助于减少酸性形成引起的细菌破坏。

六、使用Cary-Blair运输培养基的限制和注意事项

虽然Cary-Blair运输培养基在保存许多细菌样本的生命活力和形态方面非常有效,但在使用该培养基时,必须认识到其局限性并采取必要的预防措施。

Cary-Blair运输培养基可能不适用于所有类型的微生物。例如,它不适用于厌氧菌,病毒或真菌的保存。因此,在处理可能含有这些微生物的样本时,应采用替代性运输培养基或专门的采集方法。

在潜在危险和安全措施方面,必须小心处理Cary-Blair运输培养基,因为其中的某些成分(例如硫代乙酸钠)如果被吞咽或吸入可能会有害。在样本采集和处理过程中必须戴上适当的个人防护装备,如手套和安全眼镜,以最小化暴露风险。

(1)限制:

1. 培养基的pH:室温下的pH应在8.3-8.5范围内。

2. 保质期:Cary-Blair运输培养基在紧密封闭的容器中存放在阴凉,暗处可以高度稳定,以防止干燥。在没有容量损失,污染,pH改变或颜色变化的情况下,可以使用该培养基长达一年。

(2)注意事项:

1. Cary-Blair培养基专门用于运输目的。运输或处理样本的延迟时间过长可能会导致细菌细胞的生命活力下降,并可能允许污染的微生物在培养基中繁殖。因此,快速运送和处理样本对于准确和确定性的实验室结果至关重要。

2. 对于识别志贺菌,及时在Cary-Blair培养基中进行板接,冷藏或冷冻是非常重要的,因为比其他肠道细菌更脆弱。Cary-Blair运输培养基对极端温度非常敏感,不能进行自动消毒。虽然已经确认了其可消毒性,但不能100%保证。

3. 在开始使用抗生素治疗后采集的样本可能无法准确反映肠道病原菌的存在或缺失,从而可能影响治疗结果。

微生物学领域不断发展,随之而来的是运输培养基的进步和创新,包括Cary-Blair运输培养基。研究人员正在探索新的配方,添加剂和技术,以进一步改善细菌样本的保存,并扩大运输培养基适用的微生物范围。

文章为麦瑞科林原创,如需转载,请注明文章链接和出处。

返回顶部